Cromatografía de proteínas
Técnico Responsable
Mónica Gay Martín bioquimica.lti@uva.es
Tlfs: 983.184678
Campus de Valladolid
Principios de la Técnica
En muchas aplicaciones experimentales es necesario disponer de proteínas purificadas, incluyendo estudios estructurales y ensayos bioquímicos in vitro. Esta purificación de proteínas implica aislarlas a partir de su fuente en base a diferencias en sus propiedades físicas. El objetivo de un esquema de purificación es retener la mayor cantidad de proteína funcional con el menor número de contaminantes.
Los sistemas de cromatografía de media presión permiten el aislamiento, purificación y análisis desde escala preparativa a analítica de múltiples tipos de moléculas:
- Purificación de proteínas recombinantes
- Purificación de anticuerpos monoclonales
- Eliminación de virus, preparaciones de proteínas
- Análisis de proteínas plasmáticas para el diagnóstico de enfermedades
Equipo
En nuestro laboratorio contamos con el sistema de cromatografía de media presión NGC Quest 10 Plus, de Biorad.
El instrumento NGC Quest 10 Plus incluye los siguientes elementos:
- Una válvula de inyección de muestra NGC (kit de válvula de inyección de muestra) para la aplicación automatizada de pequeños volúmenes de muestra de bucles de muestra (1ml)
- Dos bombas automatizadas de 10 ml/min que proporcionan gradientes precisos para separaciones de alta resolución para cualquier aplicación.
- Tiene un detector de múltiples longitudes de onda con monitoreo simultáneo de cuatro longitudes de onda para la detección de alta precisión de proteínas, péptidos y ácidos nucleicos combinados con mediciones de conductividad.
- Las muestras fraccionadas se pueden recolectar fácilmente desde purificaciones a escala analítica hasta preparativa utilizando el colector de fracciones BioFrac.
Además, como equipamiento complementario se dispone de un sistema de electroforesis en gel integrado por:
- Cubetas Criterion™ y Mini-PROTEAN Tetra Cell
- PowerPac™ Basic Power Supply.
- Sistema de análisis Gel Doc™ EZ System
