Técnico responsable
Marta Isabel Ozores Belmonte cromatografia.lti@uva.es
Tlf: 983.184682
Campus de Valladolid
Principios de la técnica
En la cromatografía líquida, la fase móvil es un líquido que fluye a través de una columna que contiene a la fase fija. La separación cromatográfica en HPLC es el resultado de las interacciones específicas entre las moléculas de la muestra en ambas fases, móvil y estacionaria
A diferencia de la cromatografía de gases, la cromatografía de líquidos de alto rendimiento (HPLC, de high-performance liquid chromatography) no está limitada por la volatilidad o la estabilidad térmica de la muestra.
La HPLC es capaz de separar macromoléculas y especies iónicas, productos naturales lábiles, materiales poliméricos y una gran variedad de otros grupos polifuncionales de alto peso molecular. Con una fase móvil líquida interactiva, otro parámetro se encuentra disponible para la selectividad, en adición a una fase estacionaria activa.
La HPLC ofrece una mayor variedad de fases estacionarias, lo que permite una mayor gama de estas interacciones selectivas y más posibilidades para la separación.
HPLC preparativa
Es la técnica escogida para aislamiento y purificación de productos de valor en las industrias químicas y farmacéuticas así como en la biotecnología y la bioquímica. La cromatografía preparativa comprende un amplio rango de aplicaciones, desde el aislamiento de 1µg de muestra para identificación espectroscópica hasta el aislamiento de un compuesto puro de una mezcla de 100 g.
Aplicaciones
Campos de Aplicación de HPLC
- Fármacos: Antibióticos, sedantes esteroides, analgésicos
- Bioquímica: Aminoácidos, proteínas, carbohidratos, lípidos
- Productos de alimentación: Edulcorantes artificiales, antioxidantes, aflatoxinas, aditivos
- Productos de la industria química: Aromáticos condensados, tensoactivos, propulsores, colorantes
- Contaminantes: fenoles, Pesticidas, herbicidas, PCB
- Química forense: Drogas, venenos, alcohol en sangre, narcóticos
- Medicina clínica: Ácidos biliares, metabolitos de drogas, extractos de orina, estrógenos.
Algunas aplicaciones importantes de la HPLC preparativa
- Separación y purificación de metabolitos
- Separación y purificación de los metabolitos de las drogas procedentes de muestras de orina
- Purificación y separación de enantiómeros
- Purificación de compuestos naturales
- Purificación y caracterización de enzimas y proteínas
Funcionamiento del servicio
Las muestras deben ir acompañadas de la hoja de solicitud de servicios generada en esta página web una vez realizado el registro en la misma. El ususario debe rellenar todos los campos de la solicitud de servicios que conozca, con el fin de obtener el mejor resultado posible.
Equipos
HPLC analítico 1200 Series de Agilent Technologies
- Detector de longitud de onda variable G1314B
- Detector de diodo y de longitud de onda variable G1315D
- Detector de índice de refracción G1362A
- Detector de fluorescencia G1321A
HPLC preparativo 1200 Series de Agilent Technologies
- Dos Bombas preparativas G1361A
- Detector de diodo y de longitud de onda variable G1315D
- Muestreador automático G1329A
- Colector de fracciones G1364B
