PCR cuantitativa
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Carmen Teresa Bravo Sánchez
La PCR cuantitativa (en inglés, quantitative polymerase chain reaction; qPCR o Q-PCR) o PCR en tiempo real (en inglés real time PCR) es una variante de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) utilizada para amplificar y simultáneamente cuantificar de forma absoluta el producto de la amplificación de ácido desoxirribonucleico (ADN).
Características del aparato
- Capacidad para trabajar con 96 muestras independientes de 0.2 ml en microplacas, tubos individuales o en tiras. Trabaja con un rango de volumen de 1-50 µl.
- Regula la temperatura en el rango de 0 a 100ºC con un sistema de calentamiento/enfriamiento Peltier con una velocidad máxima de temperatura de 5ºC/seg y una precisión de ±0.2ºC. La uniformidad térmica del bloque es de ±0.4ºC a 10 segundos tras alcanzar 90ºC.
- Tapa termostatizada a 105ºC y un sistema de gradiente de temperatura de 1-24 ºC con un rango operativo de 30-100ºC.
- Sistema óptico de detección fluorescente que alternativamente puede usarse para PCR convencional.
- Sistema de excitación con seis filtros LED y sistema de detección de seis fotodiodos específicos.
- El rango de excitación/emisión de 450-790 nm.
- Lectura de las 96 muestras por los seis canales en 12 segundos.
- El equipo cumple los requisitos descritos en la guía MIQE (Minimum Information for Publication.
Recomendado para ensayos de: identificación y cuantificación de todo tipo de organismos y cuantificación de la expresión génica, entre otras aplicaciones.
Métodos de cuantificación absoluta, relativa de las muestras y relativa multiplaca. Método de Presencia/Ausencia mediante curvas de meeting o disociación o mediante análisis de punto final. Método de discriminación alélica. Expresión génica mediante cuantificación relativa.
El usuario utilizará sus propios reactivos y placas y realizará los ensayos bajo la supervisión del Técnico nombrado para ello. Contactar con la responsable.
QuantStudio™ 6 Flex Real-Time PCR System
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