PCR cuantitativa

Responsable

Julio Javier Diez Casero      juliojavier.diez@uva.es

Tlf: 979.108212

Campus de Palencia

Principios de la técnica

La PCR cuantitativa (en inglés, quantitative polymerase chain reaction; qPCR o Q-PCR) o PCR en tiempo real (en inglés real time PCR) es una variante de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) utilizada para amplificar y simultáneamente cuantificar de forma absoluta el producto de la amplificación de ácido desoxirribonucleico (ADN).

Características del aparato

Capacidad para trabajar con 96 muestras independientes de 0.2 ml en microplacas, tubos individuales o en tiras. Trabaja con un rango de volumen de 1-50 µl.

Regula la temperatura en el rango de 0 a 100ºC con un sistema de calentamiento/enfriamiento Peltier con una velocidad máxima de temperatura de 5ºC/seg y una precisión de ±0.2ºC. La uniformidad térmica del bloque es de ±0.4ºC a 10 segundos tras alcanzar 90ºC.

Tapa termostatizada a 105ºC y un sistema de gradiente de temperatura de 1-24 ºC con un rango operativo de 30-100ºC.

Sistema óptico de detección fluorescente que alternativamente puede usarse para PCR convencional.

Sistema de excitación con seis filtros LED y sistema de detección de seis fotodiodos específicos.

El rango de excitación/emisión de 450-790 nm.

Lectura de las 96 muestras por los seis canales en 12 segundos.

El equipo cumple los requisitos descritos en la guía MIQE (Minimum Information for Publication.

Aplicaciones

Recomendado para ensayos de: identificación y cuantificación de todo tipo de organismos y cuantificación de la expresión génica, entre otras aplicaciones.

Métodos de cuantificación absoluta, relativa de las muestras y relativa multiplaca. Método de Presencia/Ausencia mediante curvas de meeting o disociación o mediante análisis de punto final. Método de discriminación alélica. Expresión génica mediante cuantificación relativa.

Funcionamiento del Servicio

El usuario utilizará sus propios reactivos y placas y realizará los ensayos bajo la supervisión del Técnico nombrado para ello. Contactar con la responsable.

Equipo

QuantStudio™ 6 Flex Real-Time PCR System

Universidad de Valladolid
Laboratorio de Técnicas Instrumentales
Edificio I+D - Campus Miguel Delibes
Paseo de Belén nº11, 47011 Valladolid. Teléfono: 983.42.34.75
Parque Científico UVA
Desarrollado por Logiciel
Alojamiento Bip Asesoría Tecnológica